Hydroethidine 活性氧荧光探针（蓝色，红色），荧光染料在科研中具有的优势及应用
Hydroethidine 活性氧荧光探针（蓝色，红色）是常用的 DNA 染料溴化乙锭的还原形式，它可以检测活细胞内的氧化活性，也可以检测吞噬细胞的“呼吸爆发”。Hydroethidine 活性氧荧光探针（蓝色，红色） 本身在细胞中具有蓝色荧光，当它进入细胞中，脱氢后会成为氧化形式的乙锭，当与 DNA 或 RNA 嵌合时，会发出红色荧光。
Hydroethidine（HE，又称 DHE）活性氧荧光探针的优势集中在超氧阴离子特异性强、双荧光适配多场景、成像干扰小且细胞兼容性好，是活性氧检测中针对性与实用性兼具的优质探针，具体如下：
1.特异性顶尖，检测精准无干扰：它对超氧阴离子（O₂⁻）具有高度特异性，进入细胞后仅易被超氧阴离子氧化，对过氧化氢等其他活性氧的氧化效率仅为超氧阴离子的 1/20 以下，还能区分超氧阴离子与过氧化氢，无需额外添加抑制剂，检测特异性超 95%。同时它可穿透线粒体膜，既能检测线粒体呼吸链产生的超氧阴离子，也能捕捉胞质中相关酶产生的超氧阴离子，适配不同部位超氧阴离子的研究。
2.双荧光特性，适配不同检测需求：探针本身呈蓝色荧光，与超氧阴离子反应后的氧化产物嵌入核酸会产生红色荧光。蓝色可作为探针负载成功的参照，红色荧光强度则能精准反映超氧阴离子浓度，且红色荧光量子产率高，氧化后荧光增强倍数超 100 倍，检测限低至 5nM，能捕捉细胞静息态与激活态下超氧阴离子的细微浓度波动。此外红色荧光远离细胞自发荧光波段，生物背景极低，信噪比可达 35:1 以上，还具有较强的组织穿透性，能穿透 3D 细胞球、类器官核心区域等，适配深层组织样本成像。
3.细胞兼容性佳，实验可靠性高：该探针为脂溶性，可自由穿透活细胞膜，无需透膜处理。其工作浓度仅 1 - 5μM，在此浓度下对细胞活性、线粒体呼吸链功能等无显著影响，细胞毒性低。像对心肌细胞标记后，细胞收缩频率正常；对神经元标记也不会影响突触传递功能，还能支持 24 小时以上的长期动态观察。
4.操作便捷，适配多类检测平台：使用时直接加入培养基与细胞共孵育 15 - 30 分钟即可，无需复杂预处理步骤，相比免疫荧光标记大幅节省时间。且兼容性强，可适配荧光显微镜、流式细胞仪、酶标仪等常规检测设备，既能观察超氧阴离子在细胞内的空间分布，也能定量细胞群中相关阳性细胞比例，还可用于模式生物的活体成像。
Hydroethidine（HE，又称 DHE）活性氧荧光探针因能特异性响应超氧阴离子（O₂⁻・）等 ROS，且可产生蓝色、红色双荧光信号，广泛应用于 ROS 相关的生命科学与医学研究，核心应用领域如下：
1.氧化应激与细胞信号通路研究
检测细胞在缺氧 / 复氧、紫外线照射、机械损伤等刺激下，超氧阴离子的产生与时空分布。
探究 ROS（尤其是 O₂⁻・）在细胞信号传导中的作用，比如调控 MAPK、NF-κB 等通路的激活机制。
2.疾病机制与病理研究
肿瘤研究：检测肿瘤细胞及肿瘤微环境中 ROS 的异常升高，分析其在肿瘤增殖、侵袭、血管生成中的作用。
神经退行性疾病：探究帕金森病、脑缺血等疾病中，神经细胞内超氧阴离子累积引发的氧化损伤机制。
心血管疾病：研究动脉粥样硬化、心肌缺血等过程中，血管内皮细胞、心肌细胞的 ROS 过量产生与组织损伤的关联。
炎症研究：检测巨噬细胞、中性粒细胞等炎症细胞激活后，ROS 的释放及其在炎症反应中的介导作用。
3.药物研发与筛选
筛选抗氧化药物：评估候选药物（如天然提取物、小分子化合物）清除超氧阴离子、抑制 ROS 生成的能力。
评估药物毒性：检测药物是否诱导细胞产生过量 ROS，进而引发氧化应激损伤，为药物安全性评价提供依据。
4.环境与毒理学研究
检测重金属、农药、工业污染物等对细胞或模式生物的氧化损伤，明确污染物通过诱导 ROS 产生的毒性机制。
评估食品、保健品等对生物体系 ROS 水平的影响，为其安全性与功能性评价提供支撑。
5.组织与活体成像研究
借助红色荧光（氧化产物 Ethidium 的荧光）穿透性强的特点，用于组织切片、模式生物（如斑马鱼、小鼠）的活体 ROS 成像。
动态观察体内特定组织或器官在生理、病理状态下的 ROS 变化，为在体机制研究提供直观数据。