
一、基本信息
- 英文名称:AF647 carboxylic acid, tris (triethylammonium) salt;Alexa Fluor 647 carboxylic acid tris (triethylammonium) salt
- 中文名称:AF647 羧酸三乙铵盐
- CAS 号:2090339-69-6
- 分子式:C35H43N2O14S4-
- 分子量:843.98
- 性状:深红色至紫黑色固体粉末,易分散无结块
- 纯度:≥95%(HPLC 高效液相色谱质控,满足科研级生物标记实验要求)
- 溶解性:水溶性优异,易溶于 PBS、HEPES 等水性缓冲液,也可溶于 DMSO、DMF 等有机溶剂;三乙铵盐型修饰大幅改善羧基基团的疏水性,无需高比例有机相助溶,可直接在水相体系中进行活化与偶联反应。
- 保存条件:-20℃干燥避光密封保存,加入硅胶干燥剂,避免反复冻融、高温与潮湿环境;固体状态有效期 24 个月,配液后建议现配现用,小体积分装避光冻存可短期保存 1-2 周,长期储存优先保持真空干燥固体状态。
- 结构图:

二、核心结构与反应特性
- 结构核心:以 Alexa Fluor 647 远红光荧光母核为核心,分子末端带有游离羧基(-COOH),并以三乙铵盐形式存在;盐型修饰既保护羧基避免自聚与水解,又不改变荧光母核的共轭体系,保障光学性能稳定,同时柔性侧链设计降低后续偶联时的空间位阻。
- 反应特性:分子自身游离羧基反应活性较低,需经活化试剂活化后方可与生物分子发生共价偶联;常规采用 EDC/NHS(1 - 乙基 - 3-(3 - 二甲基氨基丙基) 碳二亚胺 / 琥珀酰亚胺)组合活化,活化后羧基可与蛋白、多肽、核酸等生物分子上的伯胺基团(赖氨酸残基、N 端氨基、氨基修饰位点)发生酰胺化反应,形成稳定不可逆的酰胺键;也可通过定制化偶联试剂,与含羟基、巯基的分子偶联,适配多样化实验需求。
- 活化与偶联条件:活化阶段最佳 pH 4.5-6.0,EDC/NHS 与染料摩尔比 2:1~3:1,室温避光反应 15-30min,确保羧基充分活化;活化后与目标分子偶联的最佳 pH 7.0-8.5,推荐 PBS 或 HEPES 缓冲体系,室温避光反应 30-60min,染料与目标分子摩尔比 8:1~25:1(含活化试剂损耗,可根据目标分子伯胺数量调整);全程避免体系中存在游离胺类物质(Tris、甘氨酸等),防止竞争结合活化位点。
三、关键光学性能
- 荧光波段为远红光区,与 Alexa Fluor 647 系列试剂光学参数一致,最大激发波长(Ex)≈650 nm,最大发射波长(Em)≈665 nm,精准适配流式细胞仪、激光共聚焦显微镜、荧光显微镜的远红光 / 红色检测通道,可与 AF488、AF555 等系列染料搭配实现多色荧光标记,信号无交叉干扰。
- 核心光学优势:高荧光亮度,摩尔消光系数高;光稳定性优异,抗光漂白能力强,适合长时间连续荧光成像与检测;荧光信号在 pH 4.0-10.0 范围内无显著淬灭,适配细胞裂解液、血清、组织切片等复杂生物样本检测;盐型结构与羧基基团均不影响母核荧光性能,标记后荧光信号无明显衰减,信噪比高。
四、主要应用场景
- 定制化荧光探针合成:作为基础原料,经 EDC/NHS 活化后与酶底物、受体配体、小分子抑制剂、适配体等含伯胺的化合物偶联,制备靶向性荧光探针,用于酶活性检测、细胞表面受体定位、小分子靶点追踪、生物标志物定量检测等研究。
- 生物大分子定制化标记:活化后与抗体、多肽、核酸、蛋白微球、纳米载体等生物大分子偶联,实现个性化荧光标记,弥补商品化 AF647 标记试剂的品类限制,适配特殊靶点的免疫荧光染色、流式细胞分析。
- 多色荧光成像与检测:与 AF488、AF555 等系列羧基 / 活化酯染料搭配,实现细胞、组织内多个靶点的同时标记与荧光成像,适用于蛋白共定位、细胞信号通路研究等场景。
- 生物传感平台构建:偶联至抗原、适配体、核酸探针等分子表面,构建荧光型生物传感器,用于生物样本中微量目标物的高灵敏定量检测。
五、其它
[楚肽生物提供多种Alexa Fluor 系列荧光染料及其修饰服务,服务范围包括:抗体荧光标记、多肽荧光标记、小分子荧光标记、蛋白荧光标记、糖类及其透明质酸类荧光等修饰服务。]
- AF647-NHS ester (5C-Linker);1620475-28-6
- AF647 C2 maleimide;1825332-75-9
- AF647 NHS ester (6C-Linker);407627-60-5
- AF647 NHS ester,tris(triethylammonium) salts;407627-61-6
- AF647 carboxylic acid;407627-58-1
- AF488 carboxylic acid;
- AF488 NHS ester,single 5 isomer;1374019-99-4
- AF488 NHS ester,mixture of 5/6 isomers;222164-96-7
- AF555 carboxylic acid;407627-66-1
- AF555 carboxylic acid, Tris(triethylammonium)salts;407627-67-2
- AF555 NHS ester;407627-68-3
- AF555 NHS ester,TEA salt;407627-69-4
- AF350 COOH;
- AF350 NHS ester;200554-19-4
- AF430 carboxylic acid,TEA salt;780740-46-7
- AF430 NHS ester;467233-93-8
- AF430 NHS ester,TEA salt;467233-94-9
- AF532 NHS ester;477876-64-5
- AF568 carboxylic acid;
- AF568 NHS ester,Mixture of 5/6 isomers;247145-38-6
【仅供科研专用,不得用作人体】